SARS病毒S2蛋白基因重组腺病毒的构建与分析

• 作者: 杨俊旺 熊清平 郑尚永
• 来源期刊: 江苏农业学报
• 学科: 生物学
• 关键词: SARS 刺突蛋白 S2蛋白 重组腺病毒 免疫
• 年，卷（期）: 2011,（6）
• 所属期刊栏目: 遗传育种·耕作栽培·生理生化
• 页码范围: 1216-1221
• 分类号: Q813.2
• 字数: 4802字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-4440.2011.06.009

摘要

编码SARS冠状病毒S蛋白(Spike protein)的C端序列S2较为保守,可作为SARS病毒疫苗研究的候选抗原基因.该研究拟构建基于SARS病毒S2蛋白的重组腺病毒疫苗并对其进行免疫学初步分析.首先通过非对称PCR方法,将人工合成的S2蛋白基因的两个片段f3和f4进行拼接得到完整的S2片段,利用Ad5腺病毒系统构建S2蛋白基因的重组腺病毒并在AD293细胞中包装成病毒颗粒,采用间接免疫荧光和蛋白免疫印迹法对S2蛋白基因的表达进行鉴定,然后用此重组腺病毒免疫小鼠对其抗体生长情况进行分析.免疫荧光和蛋白印迹分析结果显示,携带SARS病毒S2蛋白基因的重组腺病毒rAd-S2能在细胞中成功表达,表达的S2蛋白能被马抗SARS血清所识别.ELISA分析结果表明,用表达SARS病毒S2蛋白的重组腺病毒rAd-S2免疫小鼠,能有效刺激小鼠机体产生抗体,重组腺病毒免疫小鼠后所产生的抗体水平最高能达到104以上.可见通过对SARS病毒S2蛋白基因重组腺病毒的成功构建与免疫学初步分析,能为SARS疫苗研究奠定基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	熊清平	淮阴工学院生化学院	43	191	9.0	11.0
2	郑尚永	淮阴工学院生化学院	9	24	3.0	4.0
3	杨俊旺	淮阴工学院生化学院	2	9	1.0	2.0