氯噻啉酶联免疫分析方法研究

• 作者: 张斌 方松 施海燕 王鸣华
• 来源期刊: 农药学学报
• 学科: 农学
• 关键词: 氯噻啉 半抗原 多克隆抗体 酶联免疫
• 年，卷（期）: 2011,（3）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 287-292
• 分类号: R392.11|S482.3
• 字数: 4306字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1008-7303.2011.03.13

摘要

建立了基于多克隆抗体的氯噻啉间接竞争酶联免疫分析(ic-ELISA)方法.设计合成了氯噻啉半抗原,将其分别与牛血清蛋白(BSA)和卵清蛋白(OVA)偶联制备免疫原和包被原.用免疫原免疫新西兰大白兔,制备多克隆抗体,抗体效价为2.56×106.通过对有机溶剂含量、离子强度和pH等影响因素的优化,确定了氯噻啉ic-ELISA的最佳检测条件(含体积分数10%甲醇的磷酸盐缓冲液、Na+浓度为0.14 mol/L、pH 7.4),并建立了氯噻啉标准竞争曲线,该方法的抑制中浓度(IC50)为0.18 mg/L,最低检测限(IC50)为0.001 8 mg/L.所得多克隆抗体除与吡虫啉有较大的交叉反应外,与其他结构相似的化合物无明显交叉反应.在水、土壤和甘蓝中分另0添加0.05～1 me,/kg的氯噻啉标准溶液,平均回收率为91.42%～l 13.82%,相对标准偏差(RSD)为0.72%～8.68%,符合农药残留检测要求.该ELISA方法可用于环境及农产品中氯噻啉残留检测.