过氧化氢对人视网膜色素上皮细胞内年龄相关性黄斑病变易感因子2表达的影响

• 作者: 周庆军 董晓光 赵中芳
• 来源期刊: 中华眼视光学与视觉科学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 色素上皮,眼 氧化性应激 细胞培养技术 年龄相关性黄斑病变易感因子2
• 年，卷（期）: 2011,（2）
• 所属期刊栏目: 视网膜疾病与视觉质量
• 页码范围: 94-98
• 分类号: R774.5
• 字数: 3927字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.1674-845X.2011.02.004

摘要

目的 研究过氧化氢(H2O2)诱导的氧化应激对人视网膜色素上皮(ARPE-19)细胞内年龄相关性黄斑病变易感因子2(age-related maculopathy susceptibility 2,ARMS2)转录和蛋白水平的影响,初步探讨ARMS2基因在氧化应激中对视网膜色素上皮细胞的作用.方法 实验研究.选用ARPE-19细胞,以浓度为0、100、300、500、700μmol/L的H2O2作用一定时间后,应用四甲基偶氮唑盐比色法(MTT)检测各浓度组H2O2作用2 h和4 h后ARPE-19细胞生长情况;采用Realtime-PCR(SYBR Green法)和细胞免疫荧光法检测ARMS2的转录及蛋白水平变化.组间比较均采用单因素方差分析,两两比较采用最小显著性差异法,H2O2浓度与细胞活性的关系采用曲线估计分析.结果 五个浓度的H2O2作用ARPE-19细胞4 h后,吸光度值分别为0.531±0.037、0.370±0.017、0.371±0.016、0.330±0.006和0.297±0.012,差异有统计学意义(F=6.782,P=0.007).曲线估计分析显示H2O2浓度与细胞活性呈高度负相关(r=-0.99.P=0.036).100～700 μmol/L H2O2作用ARPE-19细胞后,Realtime-PCR结果 Ct值分别为1.154±0.007、1.324±0.022、1.350±0.011、1.280±0.031,差异有统计学意义(F=33.409.P=0.000);H2O2浓度在300～500 μmol/L范围时,ARMS2基因mRNA表达量达到高峰,之后下降.细胞免疫荧光检测灰度值结果分别为7320±2493、14 300±848、22400±1596、23400±2405、19 200±561,差异有统计学意义(F=22.843,P=0.000);H2O2浓度在300～500 μmol/L范围时,ARMS2蛋白表达量达到高峰,之后下降.转录和蛋白水平变化趋势一致.结论 H2O2在一定浓度范围内时,可诱导氧化应激,使ARPE-19细胞内ARMS2转录和蛋白水平增加,如果H2O2的浓度超过ARPE-19细胞耐受范围,ARMS2基因表达量下降.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	董晓光		49	211	8.0	12.0
2	赵中芳		3	1	1.0	1.0
3	周庆军		9	31	4.0	5.0