提高mdr1基因体外转染骨髓造血细胞效率的实验研究

• 作者: 洪思琦 王佚 郭振华
• 来源期刊: 激光杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 多药耐药基因 转染 造血细胞
• 年，卷（期）: 2011,（5）
• 所属期刊栏目: 激光医学与医学（论文与临床报告）
• 页码范围: 73-75
• 分类号: R394
• 字数: 4428字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.0253-2743.2011.05.044

摘要

目的：探讨mdrl基因体外转染兔骨髓造血细胞的条件及转染后在细胞中的功能性表达。方法：秋水仙碱（90ng／ml）筛选含人mdrlcDNA的产病毒包装细胞PA317-HaMDR1／A，制备浓缩病毒上清液并转染兔骨髓单个核细胞；分别用PCR法、免疫组织化学法和柔红霉素（daunorubicinDNR）排出试验检测mdr1基因的整合及功能性表达。结果：经秋水仙碱筛选后，产病毒包装糖蛋白（P—glycoprotein P-gp）表达增强；外源性mdrl基因能成功的导人兔骨髓造血细胞，转染2日、4日的转染率分别为22％、37％；转入的mdr1基因能发挥药物外排泵的功能。结论：采用浓缩病毒上清转染法能成功的将外源性mdr1基因导人兔骨髓造血细胞中并获得稳定的功能性表达，为进一步研究mdr1基因转染骨髓造血细胞后自体回输在大剂量化疗中对骨髓保护作用的研究提供了依据。