百山祖冷杉SSR体系的建立及人工辅助授粉子代的初步鉴定

• 作者: 林二培 樊民亮 童再康 马海泉 骆文坚 黄华宏
• 来源期刊: 浙江农林大学学报
• 关键词: 林木育种学 SSR标记 反应体系 百山祖冷杉
• 年，卷（期）: 2011,（2）
• 页码范围: 234-240
• 分类号: S722.3
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.2095-0756.2011.02.010

摘要

应用十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)法提取百山祖冷杉Abies beshanzuensis叶片DNA.建立百山祖冷杉简单重复序列(SSR)反应体系.在体系建立过程中,采用单因素法分剐对影响聚合酶链反应(PCR)的因素进行分析.结果表明:在20.00μL反应体系中,模板DNA用量、镁离子(Mg2+)浓度、三磷酸鸟嘌呤脱氧核苷酸(dNTPs)浓度、引物浓度、Taq DNA聚合酶用量分别是60 ng,3.75 mmol·L-1,0.15 mmol·L-1,0.40 μmol·L-1,16.67 nkat(1.0 U)时结果最好.随机挑取其中1时引物扩增的多态性片段进行克隆测序,序列经比对后得到的一致性值达到94%,表明其他杉科植物的SSR引物可以在百山祖冷杉中应用.通过引物筛选,得到15对引物可在百山祖冷杉中扩增得到多态性务带,其中4对引物扩增得到的部分片段在百山祖冷杉和日本冷杉Abies firma间有明显区别.这些结果表明,利用SSR分子标记技术能够用于百山祖冷杉人工辅助授粉子代的初步鉴定.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	骆文坚		34	492	15.0	20.0
2	樊民亮		4	80	3.0	4.0