摘要:
斜纹夜蛾核型多角体病毒(Spodoptera litura multinucleocapsid nucleopolyhdrovirus,SpltMNPV)X17株是采用活体克隆法自SpltMNPV日本小笠原株分离的病毒克隆.为了揭示X17病毒株基因型,根据已发表的SpltMNPVⅡ基因组全序列(GenBank登录号:NC_011616)设计引物,PCR扩增多角体蛋白基因(polh),并与SpltMNPV不同基因型及37种其他核型多角体病毒(NPV)作分子进化比较.系统发育树显示:SpltMNPV分为SpliNPV(A)型、SpltMNPV (B)型和SeMNPV(C)型3种基因型,此结果与前人利用基因组酶切图谱的研究结果一致.X17与SpltMNPV-l和SpltMNPVⅡ处于一个分支,属于SeMNPV(C)基因型,与A型和B型相距较远.此外,扩增了 X17病毒基因38.7kD,Lef-1,Lef9,fp,p1O和p74,并与SppltMNPV,SpltMNPVⅡ,SeMNPV和SfNPV的同种基因进行同源性比较.结果表明,基于这6个ORF,X17与SpltMNPV同源性最低,其中Lef-9的氨基酸序列一致性最高,也仅为69%,38.7kD的氨基酸序列一致性只为26%.多数基因X17与SpltMNPVⅡ和SeMNPV的同源性较高,其中fp25K的氨基酸序列一致性最高,分别达95%和96%;但也有些基因同源性较低,如38.7kD的氨基酸序列一致性均为64%.因此,X17应是SpltMNPV C 基因型的一种新毒株,命名为SpltMNPVⅡ-1.该研究为X17病毒株的进一步研究利用奠定基础.