重组小鼠树突状细胞因子DCF1的原核表达和纯化

• 作者: 吴婕 居相春 文铁桥 王海烽 黄海
• 来源期刊: 生物技术
• 学科: 生物学
• 关键词: 树突状细胞因子1 DCF1 原核表达 蛋白纯化
• 年，卷（期）: 2011,（1）
• 页码范围: 23-25
• 分类号: Q816
• 字数: 1914字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1004-311X.2011.01.008

摘要

目的:克隆小鼠重组树突状细胞因子DCF1蛋白进行原核表达、纯化与鉴定.方法:采用PCR从小鼠脑cDNA克隆dcf1基因,构建DCF1原核表达重组质粒(pET30a-DCF1)并转化E.coli的BL21(DE3)菌株.IPTG诱导重组蛋白表达,并在变性条件下经Ni sepharose FF6亲和层析柱纯化,再通过SDS-PAGE和Western blotting鉴定.结果:成功克隆到大小为972bp的小鼠源dcf1基因片段并准确插入表达载体pET30a,0.1 mmol/L IPTG诱导转化菌2h可表达大量的DCF1蛋白,并可经Ni Sepharose FF6柱亲和层析得到高度纯化.结论:成功获得纯化的42kDa重组小鼠DCF1蛋白,为后续进行DCF1蛋白功能研究奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	居相春	上海大学生命科学学院	2	1	1.0	1.0
5	王海烽	上海大学系统生物技术研究所	2	1	1.0	1.0
6	吴婕	上海大学生命科学学院	2	1	1.0	1.0
7	黄海	上海大学生命科学学院	13	37	4.0	6.0
8	文铁桥	上海大学生命科学学院	24	122	5.0	10.0