核心组蛋白的融合表达和纯化

• 作者: 丁丽华 叶棋浓 徐承水 徐晓洁 曹佳 程龙 范忠义 蒋凯 韩永健
• 来源期刊: 生物技术通讯
• 学科: 生物学
• 关键词: 组蛋白 克隆 表达 融合蛋白
• 年，卷（期）: 2011,（4）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 484-487
• 分类号: Q78
• 字数: 2871字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1009-0002.2011.04.007

摘要

目的:克隆核心组蛋白H2A、H2B、H3和H4的基因,表达并纯化组蛋白与谷脱甘肤S-转移酶(GST)的融合蛋白.方法:用PCR方法从乳腺文库中扩增核心组蛋白H2A、H2B、H3和H4的编码序列,分别将其以正确相位与pGEX-KG载体中的GST编码序列融合,得到重组质粒pGST-H2A、pGST-H2B、pGST-H3和pGST-H4,分别转化大肠杆菌BL21,表达融合蛋白GST-H2A、GST-H2B、GST-H3和GST-H4;用谷胱甘肤-Sepharose 4B亲和纯化融合蛋白;用Western印迹检测融合蛋白的表达及纯化.结果:分别构建了核心组蛋白H2A、H2B、H3和H4的融合表达载体;Western印迹检测表明,融合蛋白GST-H2A、GST-H2B、GST-H3和GST-H4获得表达及纯化.结论:表达并纯化了H2A、H2B、H3和H4的融合蛋白,为进一步研究核心组蛋白的功能奠定了基础.