人端粒酶逆转录酶基因沉默对卵巢癌细胞株A2780凋亡的影响及其机制

• 作者: 姚珍薇 易永芬 杨雅莹 罗祎
• 来源期刊: 中国生物制品学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 人端粒酶逆转录酶 基因沉默 卵巢肿瘤 细胞增殖 细胞凋亡
• 年，卷（期）: 2011,（7）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 749-756
• 分类号: R737.31
• 语种: 中文

摘要

目的 检测人端粒酶逆转录酶(Human telomerase reverse transcriptase,hTERT)基因沉默对卵巢癌细胞株A2780生长抑制和凋亡的影响,并探讨其与p53、p21基因表达激活的相关性.方法 设计合成针对hTERT基因的shRNA干扰质粒,与可表达荧光蛋白的pGenesil-1.1质粒连接,构建重组质粒pG1、pG2和阴性质粒pGCR,转染A2780细胞,采用荧光定量RT-PCR检测转染细胞hTERT基因mRNA的表达,Western blot检测细胞hTERT、P53和P21蛋白的表达,TRAP法检测细胞的端粒酶活性,CCK-8法检测细胞的生长,流式细胞术分析细胞周期,AnnexinⅤ-PE/7AAD双染和TUNEL法检测细胞凋亡.结果 酶切及测序结果证实重组质粒pG1、pG2和pGCR构建正确,质粒pG1和pG2转染可明显下调A2780细胞hTERT的表达水平和端粒酶活性,而上调细胞P53和P21蛋白的表达水平;沉默hTERT基因表达能够引起A2780细胞的生长抑制和G0-G1期细胞比例明显下降,并出现明显的细胞凋亡.结论 针对hTERT基因的shRNA干扰质粒在体外能有效和特异地沉默卵巢癌A2780细胞hTERT基因的表达,降低端粒酶活性,并引起细胞的生长抑制和凋亡,其机制可能与抑癌基因p53及p21上调有关.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	姚珍薇	重庆医科大学附属第一医院妇产科	167	1511	19.0	30.0
2	杨雅莹	重庆医科大学病理教研室分子医学与肿瘤研究中心	14	31	3.0	4.0
3	易永芬	重庆医科大学病理教研室分子医学与肿瘤研究中心	58	251	8.0	13.0
4	罗祎	重庆医科大学附属第一医院妇产科	19	108	5.0	10.0