靶标诱导变构解离SELEX技术筛选皮质醇特异核酸适体

• 作者: 弓景波 张岭 战锐 王新兴 钱令嘉
• 来源期刊: 军事医学
• 学科: 医学
• 关键词: SELEX 皮质醇 核酸适体 纳米技术
• 年，卷（期）: 2011,（10）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 732-736
• 分类号: R392-33
• 字数: 4000字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-9960.2011.10.004

摘要

目的 通过指数富集配体系统进化(SELEX)技术获得皮质醇特异性核酸适体,建立高品质、超敏、易用和稳定的皮质醇检测试剂盒.方法 人工合成两端固定序列,中间为35 bp随机序列,生成80 bp长度ssDNA文库,捕获序列固定在磁珠上,文库与其退火组装,皮质醇的特异核酸适体通过我们建立的靶标诱导变构解离SELEX(TISSD-SELEX)技术获得.最后一轮的PCR产物经克隆测序,MegAlign 和RNAstructure软件分析其一级和二级结构.实时(real-time)apta-PCR方法分析G12的亲和活性.结果 经过12轮筛选后,获得10个皮质醇的核酸适体.序列分析显示,特异核酸适体以高G含量核酸序列为主,软件预测其中8个序列主要以G四联体二级结构为主,候选核酸适体 G12显示了可以作为生物探针用于皮质醇检测.结论 成功建立TISSD-SELEX技术,获得小分子靶标皮质醇核酸适体.小分子靶标无需将其偶联在固相介质或大分子上,对靶分子结构、性质无特殊要求,因而有望成为小分子靶标核酸适体筛选的通用技术方法.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张岭	军医医学科学院基础医学研究所全军军事认知与心理卫生研究中心	1	4	1.0	1.0
2	王新兴	军医医学科学院基础医学研究所全军军事认知与心理卫生研究中心	1	4	1.0	1.0
3	战锐	军医医学科学院基础医学研究所全军军事认知与心理卫生研究中心	1	4	1.0	1.0
4	弓景波	军医医学科学院基础医学研究所全军军事认知与心理卫生研究中心	1	4	1.0	1.0
5	钱令嘉	军医医学科学院基础医学研究所全军军事认知与心理卫生研究中心	1	4	1.0	1.0