果蝇odd蛋白的原核表达及多克隆抗体的制备研究

• 作者: 叶湘漓 吴秀山 张义 彭佩莹 李发祥 江志钢 王跃群 袁婺洲 赵阳 邓云 鲁建鑫
• 来源期刊: 激光生物学报
• 学科: 生物学
• 关键词: odd 融合蛋白 原核表达 多克隆抗体
• 年，卷（期）: 2011,（6）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 778-781
• 分类号: Q78
• 字数: 3015字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1007-7146.2011.06.012

摘要

odd是一个新发现的心脏特异表达基因.为了进一步研究odd在心脏发育中的功能,根据已报道的odd基因序列,以果蝇cDNA文库为模板进行PCR扩增,将所得的odd部分编码区序列连接到pET-28a载体上构建原核表达载体；重组子经酶切测序鉴定后,转化到大肠杆菌BL21菌株,IPTG诱导融合蛋白表达,Ni-IDA凝胶柱亲和纯化,纯化后的His-odd融合蛋白免疫新西兰大白兔以制备多克隆抗体,Western Blot检测抗体活性.结果表明,获得了odd原核表达重组融合蛋白以及高效价的、特异性兔抗Odd多克隆抗体,为后续的odd功能研究奠定了基础.