小麦1B/1R易位系中有活性的ω黑麦碱基因的启动子的克隆与功能验证

• 作者: 柴建芳
• 来源期刊: 农业生物技术学报
• 学科: 农学
• 关键词: 小麦 1B/1R易位系 ω-黑麦碱 启动子克隆 功能验证
• 年，卷（期）: 2011,（3）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 477-482
• 分类号: S512.103.5
• 字数: 4172字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn. 1674-7968.2011.03.011

摘要

小麦1B/1R易位系由于具有高产和适应性广等优点,在我国的小麦生产中得到了广泛的应用,但这类品种有一个共同的缺点,就是加工品质比较差,ω-黑麦碱被认为是影响其加工品质的一个重要因素.通过RNA干扰途径沉默ω-黑麦碱基因的表达,是改良小麦1B/1R易位系加工品质的一个重要策略.使用由ω-黑麦碱基因自身启动子驱动的RNA干扰表达载体,可使转入的基因在需要的部位和需要的时间表达,提高分子育种的效果.为获得有活性的ω黑麦碱基因的启动子,本研究设计了覆盖启动子区和部分编码区的一对特异引物,以小麦(Triticum aestivum)1B/1R易位系兰考906为试材,通过PCR克隆得到了与3个有转录活性的ω-黑麦碱基因有对应关系的5个启动子A9-1、H2-1、H7-1、C11和F11-1,选择与其中2个有转录活性的ω-黑麦碱基因分别有对应关系的启动子A9-1和F11-1构建以GUS为标记基因的表达载体,并用基因枪对小麦幼嫩种子进行了轰击,通过对GUS基因的瞬时表达分析,证实其中一个启动子F11-1具有活性.研究结果为构建由ω黑麦碱基因自身启动子驱动的RNA干扰表达载体提供了基础资料.