两步法分离人脐血单个核细胞的最佳条件

• 作者: 刘爱兵 沈丹 郭继强
• 来源期刊: 中国组织工程研究与临床康复
• 学科: 医学
• 关键词: 人脐血 单个核细胞 密度梯度离心法 羟乙基淀粉 两步法
• 年，卷（期）: 2011,（45）
• 所属期刊栏目: 脐血及脐带干细胞培养与分化
• 页码范围: 8447-8450
• 分类号: R394.2
• 字数: 5167字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1673-8225.2011.45.019

摘要

背景:如何获得较为纯化、高活性的干细胞,目前未见深入研究报告,也未见一个标准化操作流程方案.目的:探讨两步法分离人脐血单个核细胞最佳分离条件.方法:观察羟乙基淀粉在20,30,40,50,60,70 min不同时间沉淀脐血中红细胞的效果;使用人淋巴细胞分离液,分别在800,700,600,500,400 g/min,离心30,25,20 min的条件下分离人脐血单个核细胞.结果与结论:6%羟乙基淀粉沉淀脐血60 min效果最好;使用密度为(1.077 0±0.000 1) g/mL人淋巴细胞分离液,在4 ℃条件下以700 g/min离心力,离心30 min,洗涤3次,这样获得的人脐血单个核细胞效果最好,所得细胞沉淀中混杂细胞如红细胞及其他细胞碎片较少,人脐血单个核细胞的细胞得率及活力比较高.提示应用羟乙基淀粉沉淀和人淋巴细胞分离液分离两步法,在最佳时间条件下可提高脐血干细胞的回收率.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	沈丹	武警总医院医学实验中心	37	173	8.0	10.0
2	刘爱兵	武警总医院医学实验中心	45	309	10.0	16.0
3	郭继强	武警总医院医学实验中心	2	14	2.0	2.0