大鼠lipocalin11蛋白非保守半胱氨酸双点突变体样品制备及理化性质表征

• 作者: 林东海 顾轶娜
• 来源期刊: 药物生物技术
• 学科: 生物学
• 关键词: Lipocalin 11蛋白 半胱氨酸突变 样品制备 配体结合
• 年，卷（期）: 2011,（3）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 189-194
• 页数: 6页
• 分类号: Q51
• 语种: 中文

摘要

Lipocalin 11蛋白是新发现的一个lipocalin分泌型蛋白家族成员,与男性生殖密切相关.大鼠lipocalin 11(rLcn11)蛋白中4个半胱氨酸往往不能正确配对,为重组蛋白样品的制备带来困难.该研究通过序列比对和同源模建的方法获得rLcn11蛋白非保守半胱氨酸的位点,构建了rLcn11蛋白野生型与C59A/C156A突变体的表达系统和纯化方法.通过分子筛和圆二色谱分析rLcn11蛋白的聚集形态和结构特征,并用荧光滴定的方法研究了rLcn11蛋白与荧光探针ANS的结合能力.结果表明:(1)rLcn11蛋白非保守半胱氨酸残基的突变有利于减少蛋白的错误折叠和聚集,提高重组蛋白的产量;(2)rLcn11 C59A/C156A突变体的空间结构良好并能结合疏水性配体;(3)rLcn11蛋白Cys59、Cys156双点突变不显著地改变rLcn11蛋白的空间结构及其与配体的结合能力.该工作为rLcn11蛋白的空间结构解析和生理功能的研究奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	顾轶娜		3	23	2.0	3.0
2	林东海		4	20	2.0	4.0