组织特异表达启动子RSS1P在转TiERF1基因小麦中的应用

• 作者: 周淼平 庄洪涛 张增艳 徐惠君 李斯深 李钊 杜丽璞 蔡士宾
• 来源期刊: 作物学报
• 关键词: 水稻蔗糖合酶启动子 组织特异型表达 转基因小麦 中间偃麦草乙烯反应因子
• 年，卷（期）: 2011,（10）
• 所属期刊栏目: 研究简报
• 页码范围: 1897-1903
• 分类号: S512.1
• 语种: 中文
• DOI: 10.3724/SP.J.1006.2011.01897

摘要

从水稻叶片中克隆了一个韧皮部组织特异表达的水稻蔗糖合酶启动子(RSSlP),将RSSlP与中间偃麦草乙烯反应因子基因TiERF1相融合构成组织特异表达的TiERF1基因表达盒,取代pAHC20中Ubi::bar基因表达盒,构建成无选择标记的韧皮部组织特异表达的pA20-RSS1P::TiERF1载体.利用基因枪将pA20-RSS1P::TiERF1与pAHC20载体混合、共轰击小麦品种扬麦12的幼胚愈伤组织,获得转RSS1P::TiERF1基因小麦.对该转基因小麦T0和T1代植株进行PCR、PCR-Southern、半定量RT-PCR和荧光定量PCR分析,证实外源RSS1P::TiERF1基因已转入受体,并且具有可遗传性；转入的RSS1P::TiERF1基因仅在根、茎、叶中表达,以根部表达量最高,在种子内不表达.纹枯病抗性鉴定和主要农艺性状考察结果表明,与受体扬麦12相比,转RSSlP::TiERF1基因小麦对纹枯病的抗性有明显提高,与转Ubi::TiERF1基因小麦的抗病性相当,而且转RSS1P::TiERF1基因小麦的农艺性状没有明显改变,说明可以利用RSSlP启动子创造更实用的转基因小麦新种质.