猪繁殖与呼吸综合征病毒非结构蛋白NSP4细胞核定位研究

• 作者: 刘惠莉 方莹
• 来源期刊: 南京农业大学学报
• 学科: 农学
• 关键词: 猪繁殖与呼吸综合征病毒( PRRSV) 非结构蛋白4(NSP4) 核定位
• 年，卷（期）: 2011,（4）
• 页码范围: 89-94
• 分类号: S852.4+3
• 字数: 3689字
• 语种: 中文

摘要

为探讨PRRSV非结构蛋白4(NSP4)功能,体外构建了pEGFP-N1 -nsp4真核表达载体,转染Marc- 145细胞,利用NSP4-GFP融合蛋白携带的绿色荧光标记,研究NSP4蛋白在Marc- 145细胞中的定位,并根据蛋白疏水性设计构建有nsp4基因N端不同长度的重组pEGFP-N1表达载体,转染细胞以进一步了解NSP4蛋白是否存在核定位信号序列及其在细胞中的分布.试验结果表明:融合蛋白主要位于细胞核,部分在胞浆内.PRRSV NSP4蛋白铰链区(hinge region,HR) 145～168氨基酸是决定蛋白核内定位的功能区,该片段缺失影响NSP4蛋白进入细胞核.结论:体外转染细胞内表达的NSP4蛋白主要分布在细胞核内,HR区是其核定位信号,NSP4蛋白通过HR区信号作用主动进入细胞核内.