耐热TaqDNA聚合酶的酸酐修饰及其在降低PCR非特异性扩增中的应用评价

• 作者: 周晓薇 曹林 朱雪蛟 田玲
• 来源期刊: 浙江农业学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 热启动PCR Taq DNA聚合酶 化学修饰
• 年，卷（期）: 2011,（3）
• 所属期刊栏目: 动物科学
• 页码范围: 500-505
• 分类号: Q783
• 字数: 3551字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1004-1524.2011.03.012

摘要

酸酐能与聚合酶上的赖氨酸结合形成聚合物,试验通过选用合适的酸酐,修饰Taq DNA聚合酶.在常温下,酶活性被封闭,升温过程中不表现酶活,从而减少非特异性扩增和引物二聚体的形成;而在较高的温度下一段时间后,一般为94℃、15 min,酸酐脱落,聚合酶得以恢复正常的扩增活性,从而实现PCR反应的热启动.由此建立的热启动PCR体系灵敏度高,可以检测到10个拷贝的DNA分子,较普通PCR体系提高了2个数量级.此方法较其他方法操作简单成本低廉,且所得的热启动Taq DNA聚合酶稳定性好,便于保存,其灵敏性与特异性也更高.这种通过化学修饰形成的复合物达到热启动PCR目的的方法的建立,具有着重要的意义,是提高PCR灵敏度和特异性的重要方法之一.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	周晓薇	南京农业大学食品科技学院	7	110	2.0	7.0
2	朱雪蛟	南京农业大学动物医学院	6	6	2.0	2.0
3	曹林	南京农业大学食品科技学院	7	14	2.0	3.0
4	田玲	南京农业大学食品科技学院	1	2	1.0	1.0