不同日龄大鼠颈上交感神经节神经元电转染方法

• 作者: 刘丽 张海林 赵志英
• 来源期刊: 中国实验动物学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 大鼠SCG神经元 电转染 神经细胞培养液 siRNA
• 年，卷（期）: 2011,（5）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 391-395
• 分类号: Q95-33
• 字数: 4141字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1005-4847.2011.05.007

摘要

目的 建立一种高效电转染不同日龄大鼠颈上交感神经节(superior cervical sympathetic ganglion,SCG)神经元细胞的方法.提高转染后细胞的成活率、转染效率和干扰效率.方法 用传统的及经改良的神经元培养液分别培养电转染后的7日龄、14日龄和40日龄SD大鼠SCG细胞,24 h后用台盼蓝染色方法观察并计算细胞成活率；通过改变质粒DNA和siRNA与转染液比例,优化转染条件,于转染24h后在共聚焦显微镜下观察并计算转染效率或干扰效率.结果 改良培养液可使14日龄以上SD大鼠SCG细胞转染后成活率达到75％以上,明显高于传统培养液转染后的成活率(P＜0.01),且结果稳定,细胞状态良好,能够满足后续实验研究的要求；优化转染条件后,DNA 的转染率及siRNA的干扰率显著提高,当DNA与转染液比例为1∶100(μg∶μL)时,细胞转染率最高；当siRNA与转染液比例为1∶50(μg∶ μL)时干扰率最高.结论 通过改良神经元培养液及优化转染条件,成功提高了电转染后细胞的成活率、转染效率和干扰效率,利用电转染方法可成功转染不同日龄SD大鼠SCG神经元.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘丽	河北医科大学药理学教研室	40	347	10.0	17.0
2	张海林	河北医科大学药理学教研室	60	240	8.0	12.0
3	赵志英	河北医科大学药理学教研室	5	3	1.0	1.0