供体细胞和曲古抑菌素(TSA)对奶牛克隆胚胎发育的影响

• 作者: Josef Kucera Oto Hanus 刘亚 张运海 曹鸿国 李运生 章孝荣 章美玲 陶勇
• 来源期刊: 农业生物技术学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 曲古抑菌素(TSA) 体细胞核移植 奶牛
• 年，卷（期）: 2011,（4）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 597-605
• 分类号: Q813
• 字数: 7960字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-7968.2011.04.002

摘要

本研究探讨供核细胞处理策略(新鲜消化、-196℃冻存组(复苏后)和曲古抑菌素(TSA)处理组)和TSA-CRlaa胚胎培养液处理时间对克隆胚发育的影响.利用体细胞核移植技术生产奶牛克隆胚胎,将部分克隆胚移植给自然发情同步的受体,检验克隆胚的体内发育能力.结果显示:TSA处理体细胞组的克隆胚卵裂率和囊胚率与新鲜消化和-196℃冻存组相比差异显著(P＜0.05); -196℃冻存组与新鲜消化组差异不显著；用TSA-CRlaa分别处理新鲜消化细胞构建的克隆胚0、24、48和60 h,其中,60 h处理组的囊胚率最高(36.11±1.78％)与其他组对比差异显著(P＜0.05)；用TSA-CRlaa分别处理TSA处理组构建的重构胚24、48和60 h,结果发现,60 h TSA-CRlaa处理组囊胚率(37.39±1.78％)最高,显著高于24 h(25.48+1.34％)TSA-CRlaa处理组,且差异显著(P＜0.05).将所获得的克隆胚胎分别移植给40头自然发情的受体母牛,并观察移植25,45,65和90d后的返情情况,结果显示,各组受孕率无统计学差异,但经TSA处理细胞和胚胎组移植的受体中,获得一头存活的体细胞克隆奶牛.说明优化的处理方法处理胚胎可以完成体内发育.