根癌农杆菌介导里氏木霉转化体系的建立和条件优化

• 作者: 刘刚 康康 杨长得 田生礼 邢苗
• 来源期刊: 生物技术
• 学科: 生物学
• 关键词: 里氏木霉 根癌农杆菌 分生孢子 潮霉素磷酸转移酶 双元载体
• 年，卷（期）: 2011,（4）
• 所属期刊栏目: 技术与方法
• 页码范围: 44-48
• 分类号: Q786
• 字数: 3600字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1004-311X.2011.04.098

摘要

目的:采用根癌农杆菌介导的转化方法实现丝状真菌里氏木霉的遗传转化,并优化转化条件.方法:构建含潮霉素抗性基因(hph)的双元载体pCAM-hph后,转化根癌农杆菌LBA4404获得转化菌株.将根癌农杆菌的转化菌株和里氏木霉的分生孢子共培养后在含100μg/mL潮霉素的抗性平板上筛选里氏木霉转化子,并采用PCR扩增和序列测定对转化子中的插入片段进行了分析.结果:使用根癌农杆菌介导的转化方法转化里氏木霉,每106个分生孢子可获得25.8个转化子.最佳的转化条件为:农杆菌初始浓度为OD660约为0.8,孢子数为106个,共培养时间为48h,pH为5.0～5.5,培养温度为28℃.结论:建立了根癌农杆菌介导的里氏木霉转化方法,并获得了最佳的转化条件.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘刚	深圳市微生物基因工程重点实验室深圳大学生命科学学院	7	78	5.0	7.0
2	邢苗	深圳市微生物基因工程重点实验室深圳大学生命科学学院	9	125	7.0	9.0
3	田生礼	深圳市微生物基因工程重点实验室深圳大学生命科学学院	3	10	1.0	3.0
4	杨长得	深圳市微生物基因工程重点实验室深圳大学生命科学学院	2	36	2.0	2.0
5	康康	深圳市微生物基因工程重点实验室深圳大学生命科学学院	1	9	1.0	1.0