摘要:
本研究旨在探讨聚乙烯吡咯烷酮(Polyvinyl pyrrolidone,PVP)作为缓释剂在羔羊卵泡诱导发育中的应用效果,以及品种、年龄、激素剂量和超排次数对活体采集卵母细胞数量和体外发育能力的影响.选用4~12周龄无角道塞特、萨福克母羔120只,分为15%PVP一次肌注组、30%PVP一次肌注组和常规递减注射组,每组40只,注射剂量均为120 IU,对30%PVP一次肌注组按品种、周龄、激素剂量和重复次数分为3~4小组,分别进行卵泡诱导发育和活体采卵,并与屠宰厂采集的卵母细胞对比进行体外受精和胚胎移植.结果表明,采用30%PVP缓释FSH进行羔羊超排,可以起到与常规超排一致的效果,二者差异不显著(P>0.05),但采用15%PVP缓释FSH进行羔羊超排没有取得理想的效果,在各项指标上均显著低于30%PVP组和常规递减注射组(P<0.05);采用30%PVP缓释FSH分别超排道塞特和萨福克羔羊,只均获卵数和可用卵数差异不显著(P>0.05),4、6和8周龄羔羊只均获卵数和可用卵数显著高于12周龄羔羊组(P<0.05),40 IU组只均获卵数显著低于80、120和240 IU剂量组(P<0.05),240 IU剂量组只均获卵数最高,但与120 IU剂量组相比差异不显著(P>0.05),重复超排后只均获卵数和可用卵数显著低于初次超排(P<0.05),同时超排成功率也显著下降(P<0.05);与屠宰场采集的卵母细胞相比,活体采集的羔羊卵母细胞体外成熟率、卵裂率、桑椹胚率和囊胚率均较低(P<0.05),但受精率二者差异不显著(P>0.05);分别冷冻保存了95和140个羔羊体外受精胚胎与屠宰场体外受精胚胎,复苏后存活率分别为95.8%和94.3%,随后进行了胚胎移植,移植后的妊娠率二者差异不显著(P>0.05),分别产羔2和7只.结果提示,采用30%PVP缓释技术进行羔羊卵泡诱导发育,可以取代常规的递减注射法;年龄、激素剂量和超排次数影响活体采集的卵母细胞数量,4周龄的道塞特羔羊采用30%PVP缓释120 IU FSH可得到最高的只均获卵数和可用卵数,活体采集的羔羊卵母细胞可经体外受精和胚胎移植获得后代,具有与屠宰场采集的成羊卵母细胞相同的体外发育能力.