不同方法从小鼠胚胎干细胞分化拟胚体

• 作者: 张铭 焦成瑾 王廷璞 袁毅君
• 来源期刊: 中兽医医药杂志
• 学科: 农学
• 关键词: 胚胎干细胞 拟胚体 分化
• 年，卷（期）: 2011,（3）
• 所属期刊栏目: 调查研究
• 页码范围: 5-10
• 分类号: S859.7
• 字数: 6521字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-6354.2011.03.001

摘要

建立简便有效的胚胎干细胞体外分化研究中制备拟胚体的方法.本实验以3种方法形成拟胚体:滋养层过生长法、悬浮法和胶原酶处理法,并与传统的悬滴法进行了比较.在不同的分化培养体系中以最终分化出搏动的心肌细胞评价形成有分化发育能力的拟胚体的效率.以RT-PCR检测了拟胚体和心肌细胞形成中基因的表达.结果表明,4种方法分化出搏动心肌细胞的比例不同.滋养层过生长法形成拟胚体的比例接近悬滴法,而悬浮法和胶原酶处理形成拟胚体的比例显著低于滋养层过生长法和悬滴法.形态学研究显示,拟胚体发育经历了简单拟胚体阶段到囊状拟胚体或成熟拟胚体.在拟胚体成熟过程中特异性胚层分化发育分子标记HNF-4、Bmp-4与Otx-2表达上调,与心肌细胞分化相关的基因α-MHC、β-MHC、GATA-4及Nkx2.5同样表达上调.表明不同途径可获得不同比例的有发育能力的拟胚体,在体外分化研究中滋养层过生长法则是简便有效的获得正常发育拟胚体的方法.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王廷璞	天水师范学院生命科学与化学学院	116	1057	15.0	28.0
2	张铭	浙江大学生命科学学院	57	1372	20.0	36.0
3	袁毅君	天水师范学院生命科学与化学学院	67	483	12.0	20.0
4	焦成瑾	天水师范学院生命科学与化学学院	44	145	7.0	10.0