抗除草剂转基因大豆插入拷贝数及其旁侧序列分析

• 作者: 仇有文 刘营 张明辉 敖金霞 袁肖寒 高学军
• 来源期刊: 生物技术
• 学科: 农学
• 关键词: 抗除草剂转基因大豆 旁侧序列 拷贝数 基因组步移 接头PCR
• 年，卷（期）: 2011,（6）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 31-35
• 分类号: S188
• 字数: 2976字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1004-311X.2011.06.146

摘要

目的:确定抗除草剂转基因大豆外源基因拷贝数和其插入位点侧翼序列.方法:采用绝对定量PCR法测定转EPSPS基因大豆中外源基因拷贝数,内参照基因标准曲线选用大豆凝集素(Lectin)基因为标准品,外源基因标准曲线以含EPSPS基因的阳性质粒为标准品.采用基因组步移技术和巢式PCR方法确定抗除草剂转基因大豆插入位点旁侧序列.结果:抗除草剂转基因大豆外源基因的拷贝数为1.CaMV35S上游扩增887bp,NOS下游扩增1 340bp.结论:明确了EPSPS外源基因在转基因大豆中为单拷贝,转基因大豆插入位点附近大豆基因组发生了DNA重排.