慢病毒介导的RNA干扰技术构建hOGG1和hMTH1基因缺陷细胞模型

• 作者: 杨淋清 柯跃斌 袁建辉 黄娟
• 来源期刊: 癌变·畸变·突变
• 学科: 生物学
• 关键词: 慢病毒 RNA干扰 hOGG1 hMTH1
• 年，卷（期）: 2011,（1）
• 页码范围: 4-8
• 分类号: Q78
• 字数: 3441字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1004-616x.2011.01.002

摘要

目的:分别建市8-羟基鸟嘌呤糖苷酶1 (human 8-hydroxyguanine glycosylase,hOGG1)基因和8-羟基鸟嘌呤核苷酸酶(human Mut T homlogue,hMTH1)基因缺陷细胞模型,为进一步研究两个基因的相互关系提供理想的研究平台.方法:利用慢病毒载体介导的小发夹状RNA(small hairpin RNA,shRNA)转入人胚胎肾细胞(293FT)包装慢病毒,用所得到的慢病毒感染人胚肺成纤维细胞(HFL),杀稻瘟菌素筛选稳定表达的细胞株,荧光显微镜下观察慢病毒的包装效率和感染效率,Real-time RT-PCR鉴定基因干扰效果.结果:得到了滴度较高的慢病毒,感染靶细胞后得到hOGG1基因和hMTH1基因缺陷细胞模型,hOGG1 mRNA和hMTH1mRNA表达水平分别比正常HFL细胞下降了90%和60%.结论:通过慢病毒包装技术,成功构建hOGG1基因和hMTH1基因缺陷细胞模型.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	杨淋清		44	127	6.0	9.0
2	袁建辉		67	247	8.0	11.0
3	柯跃斌		48	202	8.0	11.0
4	黄娟		4	7	1.0	2.0