肝细胞内人类次要组织相容性抗原-HA8蛋白反式激活基因的筛选

• 作者: 张丽娟 成军 李越 武会娟 王琦 蓝贤勇
• 来源期刊: 解放军医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 肝炎病毒,乙型 次要组织相容性抗原 反式激活
• 年，卷（期）: 2011,（6）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 608-610
• 分类号: R512.62
• 语种: 中文

摘要

目的 应用抑制性消减杂交(SSH)技术及生物信息学技术筛选肝细胞内人类次要组织相容性抗原-HAS(HLA-HA8)的反式激活基因.方法 以HLA-HA8基因表达质粒pcDNA3.1(-)-HLA-HAB和空载体pcDNA3.1(-)转染HepG2细胞,提取mRNA并反转录合成双链cDNA(dscDNA),分别标记为Tester和Driver;经Rsa I酶切后,将Tester cDNA分成两组,分别与两种不同的接头adapter 1和adapter 2衔接,再与Driver cDNA进行两次消减杂交及两次抑制性聚合酶链反应,将产物与pGEM-T easy载体连接,构建cDNA消减文库,并转染大肠埃希菌进行文库扩增,随机挑选克隆PCR扩增后进行测序及同源性分析.结果 成功构建HLA-HA8反式激活基因差异表达cDNA消减文库.扩增后得到101个阳性克隆,菌落PCR分析均得到200～1000bp的插入片段.随机挑选其中28个阳性片段测序,同源分析结果显示,共获得16种编码基因,其中4个功能未知.结论 HLA-HA8基因反式调节基因与细胞结构和生长、物质及能量代谢、物质转运和信号转导密切相关,为HLA-HA8的功能以及HBV感染慢性化机制研究提供了新的思路.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	蓝贤勇	西北农林科技大学动物科技学院	53	334	9.0	16.0
2	成军	首都医科大学附属北京地坛医院传染病研究所	135	496	10.0	17.0
3	张丽娟	西北农林科技大学动物科技学院	19	160	8.0	12.0
4	王琦	首都医科大学附属北京地坛医院传染病研究所	96	358	11.0	16.0
5	武会娟		30	150	8.0	11.0
6	李越		6	7	2.0	2.0