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RNF185的克隆及过表达对MC3T3-E1细胞成骨分化的影响
RNF185的克隆及过表达对MC3T3-E1细胞成骨分化的影响
作者:
侯树勋
周颖
衷鸿宾
基本信息来源于合作网站,原文需代理用户跳转至来源网站获取
环指结构域
泛素蛋白连接酶类
成骨细胞
细胞分化
摘要:
目的 克隆RNF185全长基因,构建真核表达载体,检测其蛋白表达和亚细胞定位,并探讨RNF185过表达对MC3T3-E1细胞成骨分化的影响.方法 TRIzol法提取人胚肾HEK293T细胞的总RNA,经RT-PCR反应扩增出RNF185基因,并通过酶切连接将其构建到真核表达载体pCMV-Myc和pEGFP-N1上,阳性克隆经PCR及酶切鉴定后测序.测序正确后抽提质粒作为模板扩增N端截短体,构建其真核表达载体.转染MC3T3-E1检测其蛋白表达及亚细胞定位情况.采用碱性磷酸酶染色法分析RNF185过表达对MC3T3-E1细胞成骨分化的影响.结果 ①完成了RNF185的分子克隆,构建的真核表达载体pCMV-Myc-RNF185测序正确,所获得的序列与GenBank中收录的序列完全一致,N端截短体测序正确;②成功转染至MC3T3-E1细胞,蛋白相对分子质量大小与预期一致,全长形式定位于质膜;③RNF185及其N端截短体过表达均可抑制MC3T3-E1细胞的成骨分化.结论 RNF185过表达可抑制MC3T3-E1细胞的成骨分化.
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内容分析
关键词云
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文献信息
篇名
RNF185的克隆及过表达对MC3T3-E1细胞成骨分化的影响
来源期刊
军事医学
学科
生物学
关键词
环指结构域
泛素蛋白连接酶类
成骨细胞
细胞分化
年,卷(期)
2011,(6)
所属期刊栏目
论著
研究方向
页码范围
447-450
页数
分类号
Q785
字数
2464字
语种
中文
DOI
10.3969/j.issn.1674-9960.2011.06.011
五维指标
作者信息
序号
姓名
单位
发文数
被引次数
H指数
G指数
1
侯树勋
解放军总医院第一附属医院全军骨科研究所
204
1767
20.0
30.0
2
衷鸿宾
解放军总医院第一附属医院全军骨科研究所
26
114
6.0
9.0
3
周颖
解放军总医院第一附属医院全军骨科研究所
29
135
6.0
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传播情况
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引文网络
引文网络
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研究主题发展历程
节点文献
环指结构域
泛素蛋白连接酶类
成骨细胞
细胞分化
研究起点
研究来源
研究分支
研究去脉
引文网络交叉学科
相关学者/机构
期刊影响力
军事医学
主办单位:
军事医学科学院
出版周期:
月刊
ISSN:
1674-9960
CN:
11-5950/R
开本:
大16开
出版地:
北京太平路27号
邮发代号:
82-757
创刊时间:
1956
语种:
chi
出版文献量(篇)
4313
总下载数(次)
13
总被引数(次)
15987
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