Math1基因重组慢病毒的构建及其在293T细胞中的表达

• 作者: 付勇 刘强 刘杰 刘立思 潘松
• 来源期刊: 中国现代医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: Mathl 慢病毒 293T细胞
• 年，卷（期）: 2011,（4）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 412-417
• 页数: 6页
• 分类号: R394.3
• 字数: 5175字
• 语种: 中文

摘要

目的 构建携带Math1基因的重组慢病毒载体,检测其滴度,检测其在293T细胞中的表达.方法 PCR扩增Math1基因,将其连入慢病毒栽体pLenti-GFP中;在感受态细胞DH5α中培养扩增,并行Math1基因的测序鉴定;将重组的慢病毒四质粒共转染293T细胞,收获并浓缩病毒;感染293T细胞和提取细胞DNA后用实时定量PCR法检测病毒滴度.用逆转录PCR和westem blot法检测Mathl基因在感染病毒的293T细胞中的表达.结果 构建的慢病毒载体pLenti-Math1-GFP经测序分析证实基因序列正确.四质粒共转染293T细胞后,荧光显微镜下可见大量绿色荧光.包装后慢病毒测定滴度约为3X10"Tu/L.逆转录PCR和Western blot法均能检测Math1基因在感染病毒的293T细胞中的表达.结论 成功构建携带Math1基因的重组慢病毒,并能在293T细胞中表达.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	付勇	浙江大学医学院附属第一医院耳鼻咽喉科	29	171	7.0	11.0