pEGFP-N2-BMP2转染诱导P19细胞分化为心肌样细胞

• 作者: 张金平 张雷 李航 李莉 王慧娟 赵春芳 赵昱 赵静
• 来源期刊: 解剖学报
• 学科: 医学
• 关键词: pEGFP-N2-BMP2 基因转染 P19细胞 心肌细胞 免疫组织化学
• 年，卷（期）: 2011,（3）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 367-373
• 分类号: Q291|R329.2
• 字数: 6016字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.0529-1356.2011.03.015

摘要

目的 探讨真核表达质粒pEGFP-N2-BMP2转染P19细胞后能否诱导其分化为心肌样细胞.方法 实验分转染组和对照组,转染组以真核表达质粒pEGFP-N2-BMP2转染P19细胞并使骨形态发生蛋白2(BMP2)基因稳定表达,然后结合细胞聚集培养,对照组为培养的P19细胞.两组细胞聚集培养4d,形成聚集体后贴壁培养,于贴壁培养的4d、8d、12d、16d,免疫细胞化学和Western blotting方法检测心肌标志物心肌肌钙蛋白T (cTnT)和心肌肌动蛋白α;半定量RT-PCR检测心脏早期转录因子GATA-4和NKx2.5基因的表达.结果 转染组心肌肌钙蛋白T和心肌肌动蛋白α两种蛋白形成聚集体贴壁4d时无表达,8d、12d、16d出现表达,其表达随时间延长逐渐增强.取材各时间点之间有显著差异(P＜0.01).在转染诱导后4d时GATA-4、NKx2.5两个基因即出现弱的表达,随着时间延长,8d、12d、16d两个基因的表达逐渐增强.取材各时间点之间有显著差异(P＜0.01).对照组未发现心肌肌钙蛋白T和心肌肌动蛋白α两种蛋白的表达,亦未发现GATA-4、NKx2.5两个基因的表达.结论稳定表达BMP2基因的P19细胞可以分化为心肌样细胞,BMP2可能通过调控转录因子GATA-4、NKx2.5进而影响心肌肌钙蛋白T和心肌肌动蛋白α的表达.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王慧娟	河北医科大学组织学与胚胎学教研室	44	165	8.0	11.0
2	张雷	河北医科大学组织学与胚胎学教研室	139	703	12.0	20.0
3	张金平	河北医科大学组织学与胚胎学教研室	34	112	7.0	9.0
4	李莉	河北医科大学组织学与胚胎学教研室	77	238	9.0	11.0
5	赵静	河北医科大学组织学与胚胎学教研室	55	285	10.0	13.0
6	赵昱	河北医科大学组织学与胚胎学教研室	36	125	7.0	8.0
7	李航	河北医科大学组织学与胚胎学教研室	18	247	6.0	15.0