叶酰聚谷氨酸合成酶基因在甲氨蝶呤对映体获得性耐药A549细胞株中的表达差异

• 作者: 何晓东 凡任芝 周红艳 孙余婕 孙利 沈佐君
• 来源期刊: 中华医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 抗药性,肿瘤 甲氨蝶呤 对映体 叶酰聚谷氨酸合成酶
• 年，卷（期）: 2011,（6）
• 页码范围: 396-400
• 分类号: R9
• 字数: 5148字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.0376-2491.2011.06.009

摘要

目的 研究不同甲氨蝶呤(MTX)对映体耐药与叶酰聚谷氨酸合成酶(FPGS)基因水平表达的关系.方法 用大剂量冲击递增结合低剂量持续诱导法诱导获得两组含不同构型15～55μmol/L浓度的MTX对映体[L-(+)-MTX和D-(-)-MTX]耐药的细胞系,细胞为人源非小细胞性肺癌A549细胞,用四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测各细胞系的耐药指数;用实时荧光定量聚合酶链反应(RFQ-PCR)方法检测这两组各细胞系中胞质型FPGS(cFPGS)和线粒体型FPGS(mFPGS)基因的相对含量.结果 D-(-)-MTX耐药细胞组耐药指数高于L-(+)-MTX耐药细胞组(32.7±9.3比11.5±2.9,P＜0.05),L-(+)-MTX/A549细胞系耐药指数均在5～15之间,为中度耐药,而D-(-)-MTX/A549细胞系耐药指数均＞15,为高度耐药.在D-(-)-MTX和L-(+)-MTX两组耐药细胞系中,mFPGS表达水平仪在MTX为15 μmol/L时差异无统计学意义,在MTX其他各浓度点两组间差异均有统计学意义(25 μmol/L:2.3±0.9比1.3±0.7,35 μnol/L:2.6±0.3比1.1±0.9,45 μmol/L:1.4±0.8比1.0±1.0,55 μmol/L;1.0±0.2比0.2±0.1均P＜0.05);cFPGS表达水平在MTX为15μmol/L时两组间差异也同样无统计学意义,在25～55 μmol/L浓度区间内D-(-)-MTX/A549细胞系的cFPGS表达与耐药指数呈现高度负相关(r=-0.95,P＜0.05).结论 在A549细胞中MTX对映体初次剂量15 μmol/L冲击法诱导获得的对映体耐药与再次接受更大剂量(≥25 μmol/L)MTX诱导获得耐药的机制不同,D-(-)-MTX/A549耐药细胞系表现为更高的耐药性,提示临床使用MTX时应考虑该药物存在手性对映体问题.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	沈佐君		38	244	10.0	14.0
2	何晓东		4	24	3.0	4.0
3	周红艳		2	8	2.0	2.0
4	孙余婕		3	13	3.0	3.0
5	凡任芝		1	4	1.0	1.0
6	孙利		1	4	1.0	1.0