RMP基因的表达及其对肝癌细胞凋亡的影响

• 作者: 仲蕾 季辉 王晓婷 王琦 郭云兰 魏文祥
• 来源期刊: 苏州大学学报（医学版）
• 学科: 医学
• 关键词: RPB5调节蛋白 多克隆抗体 60Co γ射线 凋亡 肝癌
• 年，卷（期）: 2011,（5）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 689-693,717
• 分类号: R735.7
• 语种: 中文

摘要

目的 制备RPB5调节蛋白(RMP)抗体并研究RMP在60Co γ射线诱导的SMMC-7721肝癌细胞凋亡过程中的表达及功能.方法 RT-PCR检测HT-29、A549、Hep-2、SGC-7901、293T、HeLa、WI-38和SMMC-7721细胞株中RMP的表达；从质粒中PCR扩增得到人RMP基因并克隆至原核表达载体中,诱导表达后经亲和层析纯化获得融合蛋白GST-RMP/D1,以该蛋白作为抗原免疫家兔制备多克隆抗体；肝癌细胞SMMC-TT21、PFlaG-CMV4-SMMC-7721、PFlaG-CMV4-RMP-SMMC-7721经6 Gy 60Co γ射线照射后,流式细胞术检测肝癌细胞凋亡的变化.结果 RMP在以上细胞系中均有表达,但程度不同；SDS-PAGE鉴定示纯化蛋白为目的蛋白人RMP片段.Western blot结果显示,制备的多抗可与RMP蛋白特异性结合；肝癌细胞株经6 Gy60Coγ射线照射后,流式细胞术结果表明RMP使肝癌细胞SMMC-7721的凋亡减少.结论 RMP在不同细胞株中均有表达且能减少肝癌细胞SMMC-7727的凋亡,为RMP用于肝癌的基因治疗奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	魏文祥	苏州大学医学部基础医学与生物科学学院细胞生物学系	14	61	3.0	7.0
2	王琦	苏州大学医学部基础医学与生物科学学院细胞生物学系	28	122	7.0	10.0
3	季辉	苏州大学医学部基础医学与生物科学学院细胞生物学系	2	2	1.0	1.0
4	仲蕾	苏州大学医学部基础医学与生物科学学院细胞生物学系	3	3	1.0	1.0
5	王晓婷	苏州大学医学部基础医学与生物科学学院细胞生物学系	2	2	1.0	1.0
6	郭云兰	苏州大学医学部基础医学与生物科学学院细胞生物学系	2	2	1.0	1.0