小菜蛾气味受体蛋白PlxyOr83b基因的克隆及表达

• 作者: 刘晶晶 李珣 钟国华 陈永 龚亮
• 来源期刊: 昆虫学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 小菜蛾 气味受体 基因克隆 序列分析 原核表达
• 年，卷（期）: 2011,（5）
• 所属期刊栏目: 生理与生化
• 页码范围: 502-507
• 分类号: Q966
• 语种: 中文

摘要

[目的]克隆小菜蛾Plutella xyostella气味受体Or83b基因,并进行原核表达,为研究小菜蛾寄主选择行为的分子机理,开发昆虫行为调节剂提供基础.[方法]提取小菜蛾的总RNA,反转录获得总cDNA,采用RT-PCR方法扩增目的基因,将其克隆至T载体并测序,然后将目的基因克隆到大肠杆菌Escherichia coli表达载体pET-32a(+)中表达.经酶切、PCR及测序鉴定正确后转化BL21(DE3)菌株,用IPTG诱导表达,通过SDS-PAGE,Western印迹鉴定表达蛋白.[结果]获得了编码小菜蛾Or83b的cDNA序列,该基因阅读框长1 413bp,编码471个氨基酸,预测的等电点为7.19,命名为PlxyOr83b(GenBank登录号为GQ923610);成功构建了pET-PlxyOr83b原核表达重组质粒,目的基因获得高效表达,其融合蛋白分子量为32.0 kD,Western blot检测结果进一步表明PlxyOr83b在大肠杆菌DE3中得到正确表达.[结论]成功克降和表达了小菜蛾气味受体基因PlxyOr83b,该基因与其他昆虫Or83b基因基本一致.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	钟国华	华南农业大学昆虫毒理研究室	109	1742	22.0	36.0
2	龚亮	华南农业大学昆虫毒理研究室	9	65	4.0	8.0
3	陈永	华南农业大学昆虫毒理研究室	17	129	8.0	10.0
4	刘晶晶	华南农业大学昆虫毒理研究室	6	10	2.0	3.0
5	李珣	华南农业大学昆虫毒理研究室	5	20	3.0	4.0