KAI1对人胰腺癌MiaPaCa-2细胞自噬的影响

• 作者: 吴春燕 王华 郭晓钟
• 来源期刊: 中华胰腺病杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 胰腺肿瘤 基因,肿瘤抑制 自噬 KAI1
• 年，卷（期）: 2011,（6）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 400-403
• 分类号: R322.491
• 字数: 2554字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.1674-1935.2011.06.006

摘要

目的 观察感染Ad5-KAI1前后人胰腺癌细胞MiaPaCa-2自噬水平的变化,并初步探讨其机制.方法 应用无KAI1表达的人胰腺癌细胞MiaPaCa2,通过感染带有KAI1目的基因的复制缺陷型腺病毒Ad5-KAI1使细胞表达KAI1,以Ad5 -null感染作为阴性对照,亲本细胞为空白对照.用透射电镜观察细胞自噬小体,共聚焦显微镜观察自噬标志LC3颗粒.应用阻断剂PD98059和LY294002干预细胞,蛋白质印迹法检测自噬相关蛋白beclin 1、LC3-Ⅱ、LC3-Ⅰ及ERK-1/2、磷酸化ERK-1/2(p-ERK-1/2)、AKT、p-AKT的表达.结果 以100 MOI Ad5-KAI1感染细胞24h,表达KAI1蛋白的细胞达(84.97±8.56)％；LC3颗粒从4个左右增加到20个以上；细胞线粒体肿胀、变性,胞质内双层膜样结构增加；Beclinl表达增加(1.4±0.3)倍,LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ表达增加(8.00 ±2.78)倍.PI3K阻断剂LY294002预处理细胞后可以有效地抑制MiaPaCa-2细胞AKT的磷酸化(2.756降至1.516),但不能抑制LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值的增加(0.770增加到1.403).ERK阻断剂PD98059预处理细胞后不仅可以有效地抑制MiaPaCa-2细胞ERK的磷酸化(1.637降至0.403),而且可以抑制beclin 1蛋白表达的上调(2.377降至1.150)和LC3-Ⅱ/Lc3-Ⅰ比值的增加(2.225降至0.680).结论 KAI1明显促进MiaPaCa2细胞内自噬,它是通过ERK而不是AKT磷酸化途径促进自噬的.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	郭晓钟	沈阳军区总医院消化内科	215	688	11.0	16.0
2	吴春燕	沈阳军区总医院消化内科	30	43	4.0	5.0
3	王华		3	11	2.0	3.0