人轮状病毒ZTR-5株灭活疫苗的制备及小鼠血清免疫学评价

• 作者: 吴晋元 孙茂盛 张光明 易山 李鸿钧 杨星 贾琴妹 赵晓南 郜岩
• 来源期刊: 中国生物工程杂志
• 学科: 生物学
• 关键词: 人轮状病毒 Vero细胞 灭活疫苗 免疫试验
• 年，卷（期）: 2011,（11）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 6-10
• 分类号: Q939.4
• 语种: 中文

摘要

目的:研究人轮状病毒ZTR-5株灭活疫苗的制备及在实验小鼠中的免疫原性评价.方法:轮状病毒ZTR-5株在MA104细胞上经蚀斑筛选纯化后,获得单一克隆接种至Vero细胞上适应性培养,免疫荧光定量检测病毒的感染性滴度,对收获的病毒液进行离心、超滤、分子筛纯化,甲醛灭活,抗原定量检测Al(OH)3吸附制备的实验性疫苗.使用不同剂量(8EU、32EU、128EU、256EU)经肌内注射免疫小鼠,共免疫三次,免疫间隔2周.采用间接ELISA法检测血清特异性抗体效价.结果:通过蚀斑纯化,筛选得到一株纯化的病毒株ZTR-5纯-1,在Vero细胞上适应性后感染性滴度达7.3510gCCID50/ml；大量培养收获的病毒原液滴度为7.5710gCCID50/ml,制备获得轮状病毒样品抗原含量为2 560EU/ml；经肌内注射,初次免疫后,所有剂量组动物均获得抗体阳转,阳转率为100％；第一次加强免疫后,各组血清特异性抗体水平均明显增高,免疫剂量为128EU和256EU的两组小鼠血清抗体效价均达1∶10 240；第二次加强免疫后,各剂量组(8EU、32EU、128EU、256EU)血清抗体效价依次达1∶5 120,1∶7 456,1∶14 481.54,1∶14481.54.结论:人轮状病毒ZTR-5株可在Vero细胞上稳定增殖,所制备的疫苗具良好免疫原性,用128EU/2次免疫即可获得良好的免疫效果.