光裸星虫ISSR-PCR反应体系的单因素优化试验

• 作者: 刘丽梅 宋忠魁 彭银辉 杨家林 蔡小辉
• 来源期刊: 生物技术通报
• 学科: 农学
• 关键词: 光裸星虫 ISSR 优化 单因素
• 年，卷（期）: 2011,（1）
• 页码范围: 153-157
• 分类号: S4
• 字数: 3543字
• 语种: 中文

摘要

以光裸星虫为试验材料,通过单因素方法对影响其ISSR-PCR扩增效果的因子(模板DNA、Mg2+、dNTPs、引物、Taq DNA聚合酶、甲酰胺和二甲基亚砜)浓度进行研究.确立适合光裸星虫ISSR-PCR的反应体系:25μL体积舍1×PCR buffer、模板DNA用量为10-50 ng、Taq DNA聚合酶为0.75-1.75 U、Mg2+浓度为1.5-2.5 mmol/L、dNTP浓度为0.20 mmol/L.引物浓度为0.8-1.2 μmol/L,甲酰胺和二甲基亚砜的添加并不能优化光裸星虫ISSR-PCR反应结果.利用所建立的体系对广西北海群体的20个先裸星虫个体基因组DNA进行ISSR-PCR扫描,结果表明,优化后的体系均能扩增出清晰、多态性高的条带.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	彭银辉	广西海洋研究所广西海洋生物技术重点实验室	29	121	6.0	9.0
2	杨家林	广西海洋研究所广西海洋生物技术重点实验室	24	132	7.0	10.0
3	蔡小辉	广西海洋研究所广西海洋生物技术重点实验室	13	52	4.0	6.0
4	宋忠魁	广西海洋研究所广西海洋生物技术重点实验室	17	71	5.0	7.0
5	刘丽梅	广西海洋研究所广西海洋生物技术重点实验室	5	22	2.0	4.0