重组大鼠脑源性神经营养因子腺病毒的构建及体外表达分析

• 作者: 何芬 曹文斌 牛道立 郎洪刚
• 来源期刊: 解剖学研究
• 学科: 医学
• 关键词: BDNF 腺病毒 基因治疗 脑损伤
• 年，卷（期）: 2011,（1）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 33-36
• 分类号: R34
• 字数: 2961字
• 语种: 中文

摘要

目的 构建含有大鼠脑源性神经营养因子(BDNF)基因的重组腺病毒(AD)载体,并分析其体外表达情况.方法 将采用RT-PCR技术获取的大鼠BDNF的cDNA基因定向克隆入穿梭质粒pAdTrack-CMV中.通过与腺病毒骨架载体pAdeasy-1在细菌内同源重组形成重组腺病毒质粒pAd-BDNF,转染人胚肾293细胞后包装成有感染能力的重组腺病毒颗粒(Ad-BDNF).重组病毒感染体外培养的Hela细胞后,用RT-PCR、Western blot及免疫细胞化学检测细胞BDNF基因及蛋白表达情况.结果 pAd-BDNF测序结果和预期一致,同源重组并经293细胞包装后形成重组腺病毒Ad-BDNF,重组病毒感染Hela细胞后能高水平表达BDNF.结论 成功制备了重组腺病毒Ad-BDNF,感染细胞证实其呈分泌表达,为将其进一步应用于神经系统损伤性疾病治疗的研究打下了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	牛道立	广州医学院第一附属医院放疗科	28	245	6.0	15.0
2	何芬	广州医学院第一附属医院放疗科	17	83	5.0	8.0
3	郎洪刚	东莞市塘厦人民医院神经外科	7	15	3.0	3.0
4	曹文斌	东莞市塘厦人民医院神经外科	4	12	2.0	3.0