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摘要:
目的:制备带有穿膜肽的重组蛋白PTD-Sox2并对其活性进行鉴定.方法:通过将Sox2基因与穿膜肽基因PTD融合,利用原核表达载体pKYB进行表达,用Ni柱制备、纯化融合蛋白;用Western blot对其进行鉴定;用FITC标记PTD-Sox2,与CHO细胞孵育,检测其穿膜能力;用FRET法检测转录因子Sox2结合目的DNA的活性.结果:构建了带有穿膜肽重组PTD-Sox2的原核表达菌,制备并纯化PTD-Sox2,对其活性鉴定.结论:PTD-Sox2能够穿过细胞膜与核膜,进入细胞核内,穿膜效率为40.86%,并且可与目的DNA进行特异结合,为蛋白体外诱导iPS的产生奠定基础.
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文献信息
篇名 带有穿膜肽重组PTD-Sox2的制备及活性鉴定
来源期刊 生物技术 学科 生物学
关键词 PTD-Sox2 iPS 核转录因子 原核表达 FITC FRET
年,卷(期) 2011,(3) 所属期刊栏目 论著
研究方向 页码范围 23-29
页数 7页 分类号 Q786
字数 4959字 语种 中文
DOI 10.3969/j.issn.1004-311X.2011.03.067
五维指标
作者信息
序号 姓名 单位 发文数 被引次数 H指数 G指数
1 陈建苏 暨南大学医学院眼科 62 385 12.0 16.0
2 余榕捷 暨南大学生物工程研究所 37 174 6.0 12.0
3 王静静 暨南大学生物工程研究所 5 4 1.0 2.0
4 黄霖 暨南大学生物工程研究所 3 1 1.0 1.0
5 刘晓飞 暨南大学生物工程研究所 8 3 1.0 1.0
6 苏航 暨南大学医学院眼科 2 1 1.0 1.0
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期刊影响力
生物技术
双月刊
1004-311X
23-1319/Q
大16开
哈尔滨市道里区兆麟街68号
14-225
1991
chi
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3478
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