茶树不同器官组织总RNA提取方法的研究

• 作者: 单育 夏涛 孙美莲 杨冬青 王云生 韦朝领 骆洋 高丽萍
• 来源期刊: 激光生物学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 茶树 总RNA 器官 提取方法 简易CTAB-LiC1法
• 年，卷（期）: 2011,（1）
• 页码范围: 108-115
• 分类号: Q81
• 字数: 5755字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1007-7146.2011.01.021

摘要

从茶树组织中提取高质量的总RNA,是开展茶树基因组学、功能基因组学研究的重要前提,面RNase、多酚类物质严重干扰茶树总RNA的分离提取.鉴于茶树组织总RNA提取过程难易不一、总RNA提取质量良莠不齐的现状,现对材料用量、提取液、DNA和蛋白质抽提液、RNA沉淀试剂、多酚氧化抑制剂等进行了比较研究,建立了一种适合茶树各器官组织总RNA提取的简单高效的方法(简易CTAB-LiCl法),并与实验室常用的改良Tri-Reagent法、改良CTAB法进行了比较.核酸定量和琼脂糖凝胶电泳检测结果显示,简易CTAB-LiCl法从茶树各器官组织中提取到的总RNA质量高、得率高.总RNA的得率是改良CTAB法的1.6-5倍.因此,简易CTAB-LiCl法具有效率高、适用范围广,且操作简单、实验成本低的特点.RT-PCR和cDNA-AFLP实验表明,提取的总RNA能够用于后续的分子生物学研究.