结肠癌组织中CD133抗原的原核表达、纯化和初步鉴定

• 作者: 夏静 嵇振岭 朱小俊 沈宇清 赵刚 钱军
• 来源期刊: 东南大学学报（医学版）
• 学科: 医学
• 关键词: 大肠癌 CD133抗原 分子克隆 表达 纯化 鉴定
• 年，卷（期）: 2011,（4）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 533-537
• 分类号: R735.35
• 字数: 2906字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-6264.2011.04.001

摘要

目的:制备CD133特异性抗原用于筛选CD133单克隆抗体库,筛选产物能够与肿瘤表面的CD133抗原结合以达到靶向治疗的目的.方法:用PCR扩增CD133两段胞外区,分别将扩增的两段片段与PGEX4T-1(6*HIS)质粒结合,将连接产物转入BL21 大肠杆菌中培养,IPTG诱导表达,镍柱纯化.通过ELISA等技术对纯化后的重组蛋白进行鉴定.结果:已成功表达出CD133两段胞外区,ELISA鉴定表明,纯化后的两段CD133胞外区抗原可特异性地结合CD133抗体.结论:筛选出的两段CD133胞外区抗原可用于CD133特异性抗体的筛选.