赖型钩端螺旋体溶血素HlyX对血管内皮细胞通透性的影响

• 作者: 吴秉婷 孙湛 李道坤 鲍朗
• 来源期刊: 中国病理生理杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 钩端螺旋体 HlyX 通透性 细胞凋亡 人脐静脉内皮细胞
• 年，卷（期）: 2011,（9）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 1682-1686
• 分类号: R363
• 字数: 4801字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-4718.2011.09.004

摘要

目的:克隆表达赖型钩端螺旋体溶血素基因hlyX,观察其表达产物对人脐静脉内皮细胞(HUVECs)通透性的影响,并初步探讨其机制.方法:将hlyX基因插入原核表达载体pET32a(+),构建重组质粒pET-hlyX,转化大肠杆菌BL21(DH3)以高效表达携带组氨酸标签的Trx-HlyX融合蛋白,并作亲和层析纯化.采用生物素标记白蛋白的酶联免疫吸附法测定目的蛋白对HUVECs单细胞层通透性的影响,并以流式细胞术及Hoechst 33258荧光染色方法检测其作用于HUVECs后的细胞凋亡率.结果:成功构建了重组质粒pET-hlyX并高效表达出Trx-HlyX融合蛋白;与对照组相比较,蛋白Trx-HlyX作用于HUVECs后,明显增加其通透性(P< 0.05),细胞凋亡率显著增加(P<0.05).结论:重组质粒pET-hlyX高效表达出Trx-HlyX融合蛋白,纯化后的融合蛋白对HUVECs通透性有影响,且对HUVECs具有细胞毒性作用.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	鲍朗	四川大学华西医学中心感染免疫研究室	84	212	7.0	10.0
2	吴秉婷	四川大学华西医学中心感染免疫研究室	4	7	2.0	2.0
3	孙湛	四川大学华西医学中心感染免疫研究室	3	3	1.0	1.0
4	李道坤	四川大学华西医学中心感染免疫研究室	3	3	1.0	1.0