猪初乳中SIgA纯化及其单抗制备

• 作者: 冯志新 刘茂军 吴叙苏 王海燕 甘源 邵国青
• 来源期刊: 江苏农业学报
• 学科: 农学
• 关键词: 猪SIgA 纯化 单克隆抗体
• 年，卷（期）: 2011,（5）
• 所属期刊栏目: 畜牧兽医·水产养殖
• 页码范围: 1026-1030
• 分类号: S852.62
• 字数: 3943字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-4440.2011.05.020

摘要

为制备猪SIgA的特异性单克隆抗体,该研究采用饱和硫酸铵盐析法从猪初乳中提取猪SIgA蛋白,分别经Sephadex G-200凝胶层析、DEAE52纤维柱离子层析及Protein A柱亲合层析纯化.以纯化的猪SIgA蛋白为抗原免疫BALB/c小鼠制备抗猪SlgA的单克隆抗体.结果显示:已获得6株特异的抗猪SIgA的单克隆抗体,分别命名为2D9E6、2D9E9、3E1G2、3E1H5、4H5B7和4H5B10,6株单抗均为IgG1,κ型.将其中1株2D9E6制备腹水,经纯化后ELISA效价可达1∶81 000以上.表明以猪SIgA天然蛋白为免疫原,成功制备了6株高特异性的单克隆抗体,可为猪黏膜免疫研究提供基础材料.