羊布氏菌强毒株16M感染小鼠骨髓树突状细胞模型的建立

• 作者: 孙春辉 屈海龙 张瑞 李晓艳 杨艳玲 王兴龙 王景龙 赵勇坤 郎需龙
• 来源期刊: 中国生物制品学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 羊布氏菌 感染 小鼠 骨髓 树突细胞
• 年，卷（期）: 2011,（8）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 877-881
• 分类号: R378.5|R392.12
• 语种: 中文

摘要

目的 建立羊布氏菌强毒株16M感染小鼠骨髓树突状细胞(Dendritic cell,DC)的模型.方法 体外分离C57小鼠骨髓原代细胞,经粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(Granulocyte monocyte colony stimulating factor,GM-CSF)和重组人白细胞介素-4(Recombinant human interleukin-4,rhIL-4)诱导分化后,倒置显微镜观察DC形态,流式细胞术鉴定其分化程度.在体外建立羊布氏菌16M感染小鼠骨髓DC模型,间接免疫荧光试验和透射电镜进行鉴定,并进行感染后羊布氏菌16M的重培养及染色观察.结果 培养第5天,细胞形态符合髓源DC,伸出长的树突样和伪足样突起;第7天,细胞呈半悬浮,周围有大量突起;体外培养DC的纯度约达70%,符合试验要求.DC在感染后12h具有最强的吞噬能力,胞内细菌量最少.重培养后经染色,可观察到羊布氏菌16M典型的细菌形态.结论 成功构建了羊布氏菌感染小鼠骨髓 DC模型,为进一步研究布氏菌与DC的相互作用及胞内寄生机制奠定了基础.