人呼吸道合胞病毒F1蛋白的原核表达及纯化

• 作者: 余黎 傅生芳 包红 周旭 姜英 寇桂英 陈汉泉
• 来源期刊: 中国生物制品学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 呼吸道合胞病毒,人 F1基因 克隆,分子 原核细胞 基因表达 纯化
• 年，卷（期）: 2011,（8）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 873-876
• 分类号: R373.1|Q786
• 语种: 中文

摘要

目的 克隆A型人呼吸道合胞病毒(Human respiratory syncytial virus,HRSV)兰州分离株F1基因,并进行原核表达和纯化.方法 采用RT-PCR方法克隆RSV F1 ORF序列,克隆至pET-42b(+)表达载体,构建重组原核表达质粒pET-42b-Fl,转化大肠杆菌Rossata(DE3),IPTG诱导表达,表达产物经 SDS-PAGE和Western blot鉴定后,用GST亲和层析树脂进行纯化.结果 重组原核表达质粒经双酶切及测序证明构建正确;表达的融合蛋白相对分子质量约77000,表达量约占菌体总蛋白的20%,以包涵体和可溶性两种形式存在;该蛋自可与鼠抗人RSV单抗发生特异性反应,纯化后纯度约为50%.结论 已原核表达并纯化了HRSV Fl蛋白,为其血清抗体的制备及免疫原性研究奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	余黎	兰州生物制品研究所第二研究室	19	69	5.0	7.0
2	周旭	兰州生物制品研究所第二研究室	38	98	5.0	7.0
3	傅生芳	兰州生物制品研究所第二研究室	13	27	3.0	4.0
4	寇桂英	兰州生物制品研究所第二研究室	13	22	3.0	3.0
5	陈汉泉	兰州生物制品研究所第二研究室	10	14	2.0	3.0
6	包红	兰州生物制品研究所第二研究室	20	44	4.0	4.0
7	姜英	兰州生物制品研究所第二研究室	12	55	4.0	7.0