单管PCR-Pyrosequencing快速检测华法林代谢酶基因多态性方法的建立

• 作者: 任绪义 施宏 虞闰六 马金飞
• 来源期刊: 遗传
• 学科: 医学
• 关键词: CYP2C9 VKORC1 华法林 焦磷酸测序
• 年，卷（期）: 2011,（11）
• 所属期刊栏目: 技术与方法
• 页码范围: 1283-1290
• 分类号: R44
• 字数: 4497字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3724/SP.J.1005.2011.01283

摘要

文章旨在建立一种单管、快速及高通量的华法林药物代谢酶相关基因多态性的检测方法.通过抽取人外周血DNA,应用带有生物素标记的扩增引物,经PCR扩增并制备焦磷酸测序单链模板,于PyroMark ID焦磷酸测序仪上进行焦磷酸测序,以Sanger测序法测序结果为对照,观察分析的准确性.结果显示,华法林药物代谢酶的3个相关基因多态性(CYP2C9*2,CYP2C9*3、VKORCl(-1693)于单管中可被同时检测,一次可获得96份DNA的华法林药物代谢相关多态性位点检测结果.经与Sanger测序方法比较,符合率为100％.结果表明本方法可准确、高通量、快速检测华法林药物代谢酶相关基因多态性,与单管检测一个位点的焦磷酸测序方法相比,能有效降低检测成本,节省检测时间.该方法在个性化医疗上有较大的推广应用价值,也可以将该平台运用于其他疾病相关基因多态性检测.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	施宏		3	11	2.0	3.0
2	虞闰六		9	25	3.0	4.0
3	马金飞		2	9	2.0	2.0
4	任绪义		16	79	5.0	8.0