黑暗链霉菌DNA同源重组系统的构建

• 作者: 严绍德 封成军 朱宝泉 朱碧银 林玉双 洪文荣
• 来源期刊: 生物技术通报
• 学科: 生物学
• 关键词: 黑暗链霉菌 抗生素基因组学 同源重组 安普霉素
• 年，卷（期）: 2011,（4）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 162-166
• 分类号: Q78
• 字数: 3719字
• 语种: 中文

摘要

以黑暗链霉菌Tt-49基因组为模板,利用PCR方法,扩增安普霉素生物合成关键基因aprF-G的上、下游序列,作为同源交换臂,并将红霉素抗性基因筛选标记及其启动子插入两交换臂之间,以温敏型质粒pKC1139为基础,构建用于阻断黑暗链霉菌Tt-49安普霉素生物合成的重组质粒pFD8.该质粒通过E.coil ET12567/pUZ8002去甲基化修饰后,经接舍转移进入黑暗链霉菌Tt-49,利用红霉素抗性筛选得到3株阳性转化子,分别命名为Tt-49 AG1、Tt-49 AG2和Tt-49 AG3.通过PCR鉴定,证明pFD8已插入黑暗链霉菌Tt-49基因组的目标位点.以亲株作对照,对3株工程菌进行红霉素抗性能力考察,发现3株工程菌的抗红霉素能力均高迭1 000 μg/mL以上.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	朱宝泉		97	691	14.0	20.0
2	洪文荣	福州大学生物科学与工程学院	53	194	8.0	11.0
3	朱碧银	福州大学生物科学与工程学院	4	22	3.0	4.0
4	严绍德	福州大学生物科学与工程学院	2	15	2.0	2.0
5	林玉双		2	17	2.0	2.0
6	封成军		4	28	3.0	4.0