人ski基因真核表达载体的构建及促细胞增殖作用

• 作者: 刘苹 周元国 彭艳 李平 赵晓光 陈磊
• 来源期刊: 中国组织工程研究与临床康复
• 学科: 医学
• 关键词: 载体构建 ski pUC118 成纤维细胞 增殖
• 年，卷（期）: 2011,（41）
• 所属期刊栏目: 技术与方法
• 页码范围: 7693-7696
• 分类号: R318
• 字数: 3688字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1673-8225.2011.41.023

摘要

背景:c-Ski 既可促进组织修复,又能降低瘢痕形成,有望成为一个全新的基因治疗药物.目的:构建人ski 基因的真核表达载体,并对其促成纤维细胞增殖效果进行验证.方法:RT-PCR 法从人包皮培养原代成纤维细胞总RNA 中扩增出人ski 基因,连同真核表达启动子CMV 克隆到pUC118 载体上,酶切和测序验证后,应用脂质体将其转染到培养的大鼠皮肤成纤维细胞中.结果与结论:酶切和测序结果证实表达质粒构建成功,Western blot 显示Ski 蛋白在转染细胞中成功表达,且可显著提高转染细胞的增殖效应,说明以pUC118 为骨架的重组ski 表达质粒具有促进大鼠皮肤成纤维细胞增殖的作用.