企鹅珍珠贝镉金属硫蛋白的分离纯化及其多克隆抗体的制备

• 作者: 卢虹玉 吴晓萍 廖爱琳 廖艳 杨捷 章超桦
• 来源期刊: 水产学报
• 学科: 农学
• 关键词: 企鹅珍珠贝 镉金属硫蛋白 多克隆抗体
• 年，卷（期）: 2011,（6）
• 页码范围: 816-823
• 分类号: S917|Q955
• 语种: 中文
• DOI: 10.3724/SP.J.1231.2011.17413

摘要

镉-金属硫蛋白(Cd-MT)是水生环境中重金属镉污染的重要生物标志物,对该蛋白的研究不仅有利于Cd-MT免疫学检测方法的建立,也为水生环境重金属污染监测技术的开发提供理论依据.采用不同浓度CdCl2(0-0.8mg/L)胁迫诱导企鹅珍珠贝合成Cd-MT,通过组织捣碎、冷冻离心、热处理、SephadexG-50凝胶柱层析等方法从企鹅珍珠贝全脏器中纯化得到Cd-MT.紫外吸收显示,在CdCl2浓度为0.8mg/L时,MT粗提液中的Cd-MT特征吸收最大,表明贝体内的Cd-MT含量随着CdC12胁迫浓度的增大而增加.SDS-PAGE显示纯化后的Cd-MT及其二聚体分子量约为9ku和18ku.采用戊二醛法将获得的Cd-MT与牛血清白蛋白(BSA)偶联后免疫家兔,制备了兔抗企鹅珍珠贝Cd-MT多克隆抗血清.通过间接ELISA法检测其抗血清效价为1:12800.经饱和硫醚酸铵法和DEAE-SephadexA50亲和层析纯化得到分子量约为35ku的高纯度免疫球蛋白G(IgG).ELISA免疫鉴定显示,该IgG不仅能识别企鹅珍珠贝的Cd-MT,还与马氏珠母贝的Cd-MT有明显的免疫交叉反应.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	吴晓萍	广东海洋大学食品科技学院	41	382	12.0	17.0
2	廖爱琳	广东海洋大学食品科技学院	5	91	4.0	5.0
3	章超桦	广东海洋大学食品科技学院	203	2228	23.0	30.0
4	卢虹玉	广东海洋大学食品科技学院	25	127	7.0	10.0
5	廖艳	广东海洋大学现代生化中心	29	133	6.0	10.0
6	杨捷	广东海洋大学现代生化中心	12	65	4.0	8.0