一种高效的小鼠胰岛分离纯化新技术

• 作者: 宋陆军 常文举 李敏 秦新裕 高晓东
• 来源期刊: 中国临床医学
• 学科: 医学
• 关键词: 胰岛 分离 纯化 培养
• 年，卷（期）: 2011,（2）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 145-146,149
• 分类号: R666
• 字数: 3321字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1008-6358.2011.02.005

摘要

目的:探讨获得足够数量和较高纯度小鼠胰岛的分离及纯化方法,为进行小鼠的胰岛移植提供实验条件.方法:将6～8周,体质量25～30 g的雄性C57BL/6 小鼠腹腔麻醉后结扎胆总管,采用胶原酶Ⅴ逆行灌注、原位消化、Ficoll-400梯度离心并用无菌的毛细吸管在相差显微镜下观察并分选胰岛,双硫腙(DTZ)染色鉴定胰岛细胞.体外培养胰岛单细胞,并于第3、8、24天观察胰岛形态.结果:采用该法分离纯化后,每只小鼠可得到390±20个胰岛,胰岛呈圆形或团块状,直径50～150 μm,形态完整,折光性好,纯度达85%以上,24 d后在培养皿内铺成单个细胞.结论:本研究所用逆行灌注、原位消化及Ficoll-400梯度离心分离、纯化胰岛细胞的方法省时、高效,培养的胰岛细胞活性好,适合进一步研究的需要.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	秦新裕	复旦大学附属中山医院普外科	210	2042	26.0	39.0
2	高晓东	复旦大学附属中山医院普外科	127	1722	20.0	38.0
3	常文举	复旦大学附属中山医院普外科	22	38	4.0	5.0
4	宋陆军	复旦大学附属中山医院普外科	35	189	5.0	13.0
5	李敏	复旦大学附属中山医院普外科	93	463	11.0	17.0