阻遏矽肺纤维化的实验研究

• 作者: 余卫 刘移民 刘薇薇 叶更新 唐丽娟 张程 张继君 方茅 翁泽平 钟雪云 陈嘉榆 陈娟 陈玲珍
• 来源期刊: 中华劳动卫生职业病杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 肝细胞生长因子 髓样组细胞 肺纤维化 羟脯氨酸
• 年，卷（期）: 2011,（10）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 740-745
• 分类号: R1
• 字数: 4809字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.1001-9391.2011.10.006

摘要

目的 比较骨髓间充质样干细胞( BM-MSCs)与pcDNA3.1肝细胞生长因子(HGF)转染的BM-MSCs对SiO2所致大鼠肺泡炎和早期肺纤维化的影响并探讨其机制.方法 收集培养雄性Wistar 幼鼠的原代BM-MSCs,并进行4,6-联脒-2-苯基吲哚(DAPI)标记.将50只雄性Wistar大鼠气管滴注40mg/ml SiO2混悬液1ml造模后,随机分为模型组、BM-MSCs组和pcDNA 3.1-HGF+BM-MSCs组.造模次日,模型组(10只):尾静脉注入PBS 1 ml; BM-MSCs组(20只):尾静脉注入106个/ml BM-MSCs 1 ml;pcD-NA3.1-HGF+BM-MSCs组(20只):尾静脉注入106个/ml pcDNA3.1-HGF转染的BM-MSCs 1 ml.14和28 d后,分别处死大鼠,取肺组织冰冻切片,荧光显微镜下检测体内DAPI标记细胞；HE和Masson染色观察肺炮炎和纤维化情况；免疫印迹( Western blot)法测各组大鼠肺组织的HGF表达量；ELISA法检测肺组织中肿瘤坏死因子(TNF)-α的含量,样本碱水解法检测肺组织中羟脯氨酸(HYP)的含量.结果14、28 d时,pcDNA3.1-HGF+BM-MSCs组肺组织肺泡炎评分(14 d:1.16±0.13,28 d:0.82±0.20)均低于同时期BM-MSCs组(14 d:1.68±0.17,28 d:1.58±0.31)和模型组(14 d:2.36±0.17,28 d:2.80±0.14),BM-MSCs组肺泡炎评分均低于同时期模型组,差异均有统计学意义(P＜0.05).14、28 d时pcDNA3.1-HGF+BM-MSCs组肺纤维化评分( 14 d:0.10±0.11,28 d:1.16±0.13)均明显低于同时期BM-MSCs( 14 d:0.54±0.15,28 d:1.36±0.13)和模型组(14 d:0.64±0.09,28 d:1.84±0.17),差异均有统计学意义(P＜0.05).14、28 d时pcDNA3.1-HGF+BM-MSCs组肺组织匀浆中TNF-α含量[14 d:(280.48±23.11) pg/mg,28 d:(249.78±22.33) pg/mg]均明显低于BM-MSCs组[14 d:(342.58±35.34) pg/mg,28 d:(319.51±17.84) pg/mg]和模型组[14 d:(442.29±36.76) pg/mg,28 d:(348.53±33.95) pg/mg],BM-MSCs组肺组织匀浆中TNF-α含量低于模型组,差异均有统计学意义(P＜0.05).14、28 d时pcDNA3.1-HGF+BM-MSCs组肺组织匀浆中HYP表达量[14 d:(0.46±0.04) μg/mg,28 d:(0.65±0.05)μg/mg]均明显低于同时期BM-MSCs组[14 d:(0.63±0.04) μg/mg,28 d:(1.04±0.07) μg/mg]和模型组[14 d:(0.72±0.06) μg/mg,28 d:(1.39±0.06) μg/mg],差异均有统计学意义(P＜0.05)；28 d时,BM-MSCs组肺组织匀浆中HYP表达量低于模型组,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 应用pcDNA3.1-HGF转染后的BM-MSCs比单独应用BM-MSCs能更有效地对抗SiO2诱导的大鼠肺泡炎和早期肺纤维化,作用机制可能与其减轻肺组织的炎症有关.