基于重组外膜蛋白P2的副猪嗜血杆菌抗体间接ELISA方法的建立

• 作者: 叶严锋 宋帅 李春玲 李淼 杨冬霞
• 来源期刊: 华北农学报
• 学科: 农学
• 关键词: 副猪嗜血杆菌 重组Omp P2 间接ELISA
• 年，卷（期）: 2011,（4）
• 页码范围: 61-66
• 分类号: S852.16
• 字数: 5427字
• 语种: 中文

摘要

旨在建立一种基于重组副猪嗜血杆菌(HPS)外膜蛋白(Omp) P2的检测副猪嗜血杆菌抗体的间接ELISA方法.将重组表达的Omp P2纯化后作为ELISA包被抗原,建立了一种基于重组P2蛋白的间接ELISA方法,并对此方法的反应条件进行了优化.确定ELISA的最佳条件为:抗原包被浓度为1.5 μg/mL,被检血清1∶80稀释,辣根过氧化物酶标记的羊抗猪IgG(二抗)1∶4000稀释.确定的阴性血清临界D450nm值为0.231,阳性血清临界D450nm值为0.280.将该ELISA方法与加拿大Biovet公司生产的副猪嗜血杆菌抗体检测试剂盒做相关比较,结果符合率为88.9％.本试验建立的方法具有良好的特异性,可以用于HPS抗体的检测.