李痘病毒实时荧光定量RT-PCR检测方法的建立

• 作者: 李明福 李桂芬 王进忠 高雅红
• 来源期刊: 生物技术通讯
• 学科: 生物学
• 关键词: 李痘病毒 荧光定量RT-PCR TaqMan探针
• 年，卷（期）: 2011,（1）
• 页码范围: 77-80
• 分类号: Q502
• 字数: 2497字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1009-0002.2011.01.018

摘要

目的:建立李痘病毒(PPV)特异、灵敏、快速的实时荧光定量RT-PCR检测方法,用于核果类种苗的健康评测及李痘病毒疫情监测.方法:根据PPV-D株系和PPV-M株系的外被蛋白(CP)基因保守序列,设计特异性引物和TaqMan探针,扩增全长CP基因片段,并将其克隆到pMD18-T载体上,构建质粒标准品,建立PPV的实时荧光定量RT-PCR检测方法,并对该方法的特异性、灵敏度和重复性进行评估.结果:此荧光定量RT-PCR方法对PPV检测呈现高灵敏度和高特异性,与马铃薯Y病毒和马铃薯X病毒无交叉反应,最低检出限可达1.6×102拷贝/μL,标准曲线的相关系数为0.999 18.结论:建立了李痘病毒的荧光定量RT-PCR检测方法,可望应用于检验检疫部门对李痘病毒的快速检测.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王进忠		63	790	17.0	25.0
2	李明福		68	508	13.0	19.0
3	李桂芬		64	310	10.0	14.0
4	高雅红		3	24	2.0	3.0